Tag-Archiv: Somatische Mutation

MedWIre Nachrichten: Forscher haben das primäre Ziel der Autoantikörper im Serum von Patienten mit der Blasenhauterkrankung Pemphigus vulgaris (PV) identifiziert.

PV-Patienten entwickeln Antikörper gegen die Proteine ​​Desmoglein (DSG) 1 und 3, die epidermalen Zellen helfen, aneinander zu kleben und die Integrität der Haut zu erhalten, was zu schmerzhaften Blasen auf der Haut und den Schleimhäuten führt.

Giovanna Zambruno (Istituto Dermopatico dell'Immacolata, Rom, Italien) und ihre Kollegen fanden heraus, dass die cis-adhäsive Schnittstelle der extrazellulären DSG3-Domäne (EC) 1 das Hauptziel des im Serum von Patienten mit PV-Autoantikörper (A) 224 ist PV.

Vorhandene Therapien für die Bedingung zielen auf das gesamte Immunsystem ab, aber dies kann Probleme mit Nebenwirkungen verursachen und kann dazu führen, dass Patienten anfällig für Infektionen sind.

Um den Auslöser der Autoantikörperproduktion in PV genauer zu lokalisieren, isolierten Zambruno und Team 15-Immunglobulin (Ig) -G-Antikörper, die für DSG3 spezifisch sind, von zwei Patienten mit der Störung.

Von diesen waren drei zerstörte Schichten von Hautzellen im Labor und zwei waren pathogen, wenn sie in einem murinen passiven Transfermodell exprimiert wurden.

Die von den pathogenen PV-Antikörpern erkannten Epitope wurden zu den DSG3 EC1- und EC2-Subdomänen isoliert, und ein spezifischer serologischer Test wurde verwendet, um das Ziel des PVA224 als die cis-adhäsive Schnittstelle auf EC1 zu bestimmen.

Die Autoren vermuten, dass die bei PV beobachtete Autoreaktivität auf somatische Mutationen zurückzuführen ist, die von einem anderen Antigen als DSG3 erzeugt werden, da die Bindung an DSG3 verschwand, wenn die somatischen Mutationen in die Keimbahnsequenz zurückkehrten.

"Die Identifizierung einer immundominanten Region mit pathogenen Antikörpern hat Auswirkungen auf die Diagnose von PV und eröffnet neue Perspektiven für die Etablierung therapeutischer Ansätze zur Behandlung von PV - Patienten", schreiben Zambruno und sein Team im Journal of Clinical Investigation.

"Schließlich kann die keimige Version der PV-Autoantikörper zur Identifizierung der Antigene führen, die schließlich zur Entwicklung dieser lebensbedrohlichen Krankheit führen."

medwireNews (www.medwire-news.md) ist ein unabhängiger klinischer Nachrichtendienst von Springer Healthcare Limited. © Springer Healthcare AG; 2012

Lesen Sie unter: http://www.medwire-news.md/66/101414/Dermatology/Therapeutic_targets_for_pemphigus_vulgaris_discovered.html

Pemphigus vulgaris (PV) ist eine Autoimmun-Blasenerkrankung von Haut und Schleimhäuten, die durch Autoantikörper gegen die Desmoglein (DSG) -Familie Proteine ​​DSG3 und DSG1 verursacht wird, was zu einem Verlust der Keratinozyten-Zelladhäsion führt. Um mehr über pathogene PV-Autoantikörper zu erfahren, isolierten wir 15-IgG-Antikörper, die für DSG3 spezifisch sind, von 2-PV-Patienten. Drei Antikörper zerstörten Keratinozytenmonoschichten in vitro, und 2 waren in einem passiven Transfermodell in neonatalen Mäusen pathogen. Die von den pathogenen Antikörpern erkannten Epitope wurden auf die extrazellulären extrazellulären Domänen 3 (EC1) und EC1 von DSG2 abgebildet, Regionen, die an cis-adhäsiven Wechselwirkungen beteiligt sind. Mit einem ortsspezifischen serologischen Assay fanden wir, dass die cis-adhäsive Schnittstelle auf EC1, die vom pathogenen Antikörper PVA224 erkannt wird, das primäre Ziel der Autoantikörper im Serum von PV-Patienten ist. Die isolierten Autoantikörper verwendeten verschiedene Gene für die variable Region der schweren und leichten Kette und trugen in Übereinstimmung mit der antigenen Selektion hohe Anteile an somatischen Mutationen in komplementär bestimmenden Regionen. Bemerkenswerterweise ging die Bindung an DSG3 verloren, wenn somatische Mutationen in die Keimbahnsequenz zurückkehrten. Diese Ergebnisse identifizieren die cis-adhäsive Grenzfläche von DSG3 als die immundominante Region, auf die pathogene Antikörper in PV zielen, und zeigen an, dass Autoreaktivität auf somatischen Mutationen beruht, die in der Antwort auf ein Antigen erzeugt werden, das nicht mit DSG3 verwandt ist.

Pemphigus vulgaris (PV) ist eine lebensbedrohliche Autoimmun-Blasenerkrankung von Haut und Schleimhäuten, die durch Autoantikörper verursacht wird, die an die Cadherin-Typ-Zell-Zell-Adhäsionsmoleküle Desmoglein 3 (DSG3) und DSG1, die Hauptbestandteile von Desmosomen, binden und die Verlust der Keratinozytenzelladhäsion. Die kritische Rolle von Autoantikörpern in der PV-Pathogenese wird durch die Beobachtungen bestätigt, dass die Krankheitsaktivität mit Anti-DSG3-Antikörpertitern korreliert, dass Neugeborene von Müttern mit aktivem PV Blasen zeigen, die durch den Plazentatransfer maternaler Antikörper verursacht werden, und dass Pemphigus-ähnliche Läsionen sind induziert in neonatalen Mäusen durch passiven Transfer von Anti-DSG3-IgG von PV-Patienten.

In der Haut wird DSG3 hauptsächlich in den basalen und suprabasalen Schichten exprimiert, während DSG1 vorwiegend in den oberen epidermalen Schichten exprimiert wird. Im Gegensatz dazu wird DSG3 in nicht-körnigem geschichtetem Epithel, wie der Mundschleimhaut, im Epithel stark exprimiert, während DSG1 auf einem viel niedrigeren Niveau exprimiert wird. Das differentielle Expressionsmuster von DSG1 und DSG3 ist für klinische Varianten des Pemphigus verantwortlich: Antikörper gegen DSG3 sind in der Schleimhautform vorhanden, während Antikörper gegen sowohl DSG3 als auch DSG1 mit mukokutanen Läsionen assoziiert sind.

DSG3 ist ein Calcium-bindendes Membranglycoprotein mit einer extrazellulären Domäne, die 5 verschiedene Subdomänen (EC1-EC5) umfasst, und es wird als Proprotein synthetisiert, das in dem Golgi-Apparat durch Entfernung eines Propeptids vor dem Transport zur Zelloberfläche prozessiert wird. Die Spaltung des Propeptids findet stromaufwärts von einem konservierten Tryptophanrest in der EC1-Subdomäne statt und entlarvt Reste, die für die Bildung von homophilen Wechselwirkungen mit DSG3 an gegenüberliegenden Zellen kritisch sind. Mehrere Studien haben gezeigt, dass polyklonale Antikörper in PV-Serum primär mit dem Aminoterminus von DSG3 in den Subdomänen EC1 und EC2 (Aminosäuren 1-161) reagieren.

Die Isolierung von pathogenen mAbs ist entscheidend für die Frage nach dem Mechanismus, der die autoreaktive Reaktion induziert und die Blasenbildung bei PV-Patienten fördert. Amagai und Mitarbeiter isolierten aus einem aktiven Mausmodell von PV einen pathogenen Antikörper, AK23, der den Verlust der Zelladhäsion durch Bindung an die EC1-Subdomäne von DSG3 verursacht, die an der Bildung der trans-adhäsiven Grenzfläche beteiligt ist. Eine Anzahl von humanen anti-DSG-pathogenen und nicht-pathogenen mAbs wurde als einzelkettige variable Region-Fragmente (scFvs) von einem PV-Patienten isoliert. Ähnlich wie der AK23 mAb wurde die pathogene Aktivität dieser menschlichen Antikörper auf die aminoterminale Region von EC1 abgebildet, die durch das Propeptid maskiert ist. Zusammengenommen deuten die Human- und Maus-Daten darauf hin, dass pathogene Antikörper primär an EC1 binden und die Keratinozyten-Adhäsion stören, indem sie die trans-adhäsive Schnittstelle von DSG3 stören.

In dieser Studie isolierten wir von 2-PV-Patienten mehrere IgG-Autoantikörper, die DSG3 binden. Diese Antikörper trugen hohe Mengen an somatischen Mutationen, die für die Bindung an DSG3 benötigt wurden. Die von 3-pathogenen Antikörpern erkannten Epitope wurden in Regionen, die erwartungsgemäß an cis-adhäsiven Wechselwirkungen beteiligt sind, auf die EC1- und EC2-Subdomänen abgebildet. Diese Region erwies sich als primäres Ziel von Serum-Autoantikörpern bei PV-Patienten. Diese Ergebnisse identifizieren die cis-adhäsive Grenzfläche als die immundominante Region, auf die pathogene Antikörper in PV abzielen, und legen nahe, dass Autoreaktivität auf somatischen Mutationen beruht, die durch ein nicht verwandtes Antigen ausgelöst werden.

Vollständiger Artikel Verfügbar unter: http://www.jci.org/articles/view/64413